1 適用範圍：

本品可用於各類食品及飲用水中黴菌（jun1）和酵（jiào）母菌的計數。

2 方法原理：

將黴菌營養培養基、吸水凝膠和酶顯色劑加載在紙（zhǐ）片上，通過培（péi）養，在酶顯色（sè）劑（jì）的放大作用下，使黴菌和（hé）酵母菌在（zài）紙片上顯現出出來，通過計數（shù）報告結果。

3 方法特點：

與傳統方法相（xiàng）比，省去了配製（zhì）培養基、消（xiāo）和培養器皿的清洗處理等大量輔（fǔ）助性工作，即（jí）開即用（yòng），操作簡便。培養時間由（yóu）一周縮短為48h～72h。

4 操作方（fāng）法（fǎ）

   4.1樣品處理：無菌稱取樣品25g（或25mL）放（fàng）入含有225mL無菌生理（lǐ）鹽水的采樣瓶或（huò）均質杯內，經充分振搖做成1:10的稀釋液，用1mL滅菌（jun1）吸管吸取1:10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌水的試管內，用1mL滅菌吸管反複（fù）吸吹50次做成1:100的稀釋液，以此類推，每個稀釋度更換一支滅菌吸管。

    4.2接種：

    4.2.1一（yī）般食品選2～3個稀（xī）釋度進（jìn）行檢測，含（hán）菌量少的液體樣品（如食用純水和礦泉水等）可直接用原（yuán）液檢測。將檢驗紙片水平（píng）放台麵上，揭開上麵（miàn）的透明薄膜，用滅菌吸管吸取（qǔ）樣品原液或（huò）稀釋液（yè）1mL，均勻加到（dào）中央的濾紙片上，然後（hòu）輕輕將上蓋（gài）膜（mó）放下（xià），靜（jìng）置5min，每個稀釋（shì）度接種兩片。

   4.2.2用手指先沿方格區邊緣刮一下（xià），防止水外流，然後再在中間輕輕推刮，使水分在紙（zhǐ）片方格區（qū）內均勻（yún）分布，並將氣泡（pào）趕（gǎn）走。

   4. 3培養：將加了樣的檢驗（yàn）紙片每12片疊放在一起，放（fàng）入自封袋中，平（píng）放（fàng）在28℃培（péi）養箱內培養48h開始觀察（chá）計數。

4. 4結果判斷與計數：黴菌和酵母菌在紙（zhǐ）片上生長後會顯示藍色斑（bān）點，黴菌菌落顯示的斑（bān）點略大或有（yǒu）點擴散，酵（jiào）母菌落則較小而圓滑，許多黴菌在培養後期全呈現其本身（shēn）特有的顏色。選擇菌落數適中（10～50個）的紙片（piàn）進（jìn）行計數（shù），乘以稀釋倍數（shù）後即為每克（或（huò）毫升）樣品中黴菌和酵母菌的數目。

5 計數原則及報告方式：

5.1通（tōng）常選擇菌落在10～50個之間的紙片進行計數，乘以稀釋倍數報告之。

5.2具體計數原則可參照細菌（菌落）總數的測定方法進行。

6 附加（jiā）說明：由於黴菌常（cháng）以孢子的形式於（yú）空氣中到處傳播，而多種樣品是要求黴菌酵母菌不得（dé）撿出，因此（cǐ）檢測黴（méi）菌時（shí）需特別小心操作，取（qǔ）樣用品、稀釋用（yòng）水（shuǐ）和吸管吸頭等都需（xū）仔細（xì）消，接種時盡量避免空氣流動，動作要幹淨利落（luò），每次非常好用滅菌生（shēng）理鹽水接一片空白對照，以免出現假（jiǎ）陽性結果。